スタジオぴえろの創業者である布川ゆうじによれば、当初、赤塚不二夫生誕80周年にあわせて「おそ松くん」のリメイクを企画していたが、夕方の放送枠がとれず、何度企画を出しても流れることが1年続いた。また、深夜の放送枠では「おそ松くん」はきついとの声もあった。そこで、以前スタジオぴえろで制作した「しろくまカフェ」が人気声優を起用し、女性ファンから支持を得ていたのにならい、六つ子をイケメンにして「しろくまカフェ」と同じ声優をキャスティングするという企画が練られ「おそ松さん」として組み立てたという。

赤塚の娘であり株式会社フジオ・プロダクション代表取締役社長の赤塚りえ子は当初、企画内容に困惑し「原作（子供）の設定でお願いします」と難色を示したが、赤塚の生誕80周年を盛り上げたいという思いや生前の赤塚なら快諾するだろうと考え直し、承諾した。実際に赤塚本人は生前、青年向け連載作品『花ちゃん寝る』で大人になった六つ子たちの「不倫ネタ」や「童貞喪失ネタ」、SEXシーンまでを描き、自身の原作（『おそ松くん』）を壊して遊んでいる。

2015年7月6日に「おそ松さん」の制作が発表された。監督は『銀魂』の藤田陽一が、キャラクターデザインは映画ドラえもんシリーズで総作画監督を務めた浅野直之が担当している。藤田のほかにも、シリーズ構成に起用された放送作家の松原秀を含む『銀魂』シリーズにかかわった者たちが多く参加している。また、お笑いユニット夜ふかしの会の構成作家などで知られる岡田幸生が、お笑いを題材とした第20話Cパート「イヤミの学校」など複数の回の脚本を手がけた。

アニメ化発表に合わせてティザービジュアルが公開された。公式サイトでは「おそま通信」という架空の新聞を6のつく日に発行するという体裁でキャストや作品情報が公開されていったが、赤塚の誕生日である9月14日に「おそま通信」の号外新聞を実際に印刷して発行し、都内のタワーレコードやアニメイトで無料配布した。アニメイト池袋店にはイヤミの着ぐるみも登場した。ティザービジュアル公開前、浅野は「シンプルなキャラクターでウケるのだろうか」と不安視していたが、公開後、「かわいらしい」や「色遣いが気に入った」といった反響が寄せられた。

『おそ松さん』では6つ子が成長して大人になった後を描く。キャラクターデザインを務めた浅野は「ブラックで下品なネタは満載ですが、キャラクターの愛嬌はなくさないように心掛けています」「分かりやすくシンプルなシルエットで、カワイイけど少し毒のあるような色遣いで、一度見たら印象に残るようなキャラクターになるよう心がけてます」と話している。アニメに限らず輪郭線を描く場合は一般に黒で描くが、本作は青を使い、ソフトかつ独特な絵を出している。

監督の藤田はアニメ！アニメ！とのインタビューの中で、「『おそ松さん』の雰囲気はだらだらしているが、セリフはタイトである」とし、「『おそ松さん』はセリフの掛け合いがあまりにも多いので、ダイアローグ（登場人物同士の会話）はダイアローグではなく、アクションとして考えて、映像を編集する必要がある。例えば、0.5秒の間が空いても、セリフの言い方によっては埋まることもある」と述べている。 また、藤田はシリーズ構成の松原の書くダイアローグについても「ストーリーのために登場人物が言わされているものというよりはむしろ、より生々しい"会話"になっているため、会話のテンポを大切にしたいと思った」と述べている。編集を務めた坂本久美子も「ギャグなのでストーリーのテンポが早くなりやすかったため時折監督の藤田さんと相談しながら編集を行ったが、監督の藤田さんが考えているテンポとこちらが考えているものが近かったため、もめるようなことはなかった」と述べた。

坂本は「どの作品においてもキャラクターの言動を想像しながら編集する必要があり、『おそ松さん』ではそれを6人分やらなくてはならないので苦労した」と振り返り、パンを行うと尺が長くなり時間が掛かると話した。その一方で、坂本はアフレコ後に声優の演技を聞いて再編集することはしなかったとし、声優にはアフレコ前に一回編集した映像で演技をしてもらったと話している。

次回予告は6つ子が交代でナレーションを担当しているが、第1期・第2期6話予告回ではイヤミが担当し、第1期・第2期最終話予告では6つ子全員が次回予告をしている。次回予告が存在しない回や次回のサブタイトルのみを表示するだけの回もある。

このような番組構成になったのには藤田の制作方針が関係しており、藤田はアニメ！アニメ！とのインタビューの中で「『銀魂』の時からそうだったが、完成した映像を放送枠の尺に合わせるために伸ばすのが嫌だったため、3話目に何かを入れたり次回予告を調整した」と述べている。

アニメ「おそ松くん」の六つ子の声優は全て女性声優が担当していたが、本作では少年時代も含めて全て男性声優が担当している。スタジオぴえろが制作した「しろくまカフェ」に出演していた女性人気の高い声優が起用された。

藤田は2015年10月16日に開催されたイベント「6つ子だよ、全員集合!! トト子もいるよ♪」の場で、普段は多弁なキャラクターやテンションの高いキャラクターを演じる福山潤に対照的な一松役を打診した理由について質問を受けた際、「わりとボソッと毒を言うのが映えそうな…」と答えている。

※ 声はアニメの声優。

本作の主人公である6つ子。誕生日は5月24日。年齢は20代前半。原作やアニメ前2作では6人全員がほとんど同じ性格で外見も区別がつかなかったが、本作ではそれぞれに性格やイメージカラーが設定されると共に、表情・髪型も微妙に変えることで差別化が図られた。また、兄弟間には明確な序列が設定されており上の兄には「兄さん」という呼称をつけるが、物語の途中からは一松がカラ松を「クソ松」と呼ぶなど多少の変化が起きている。私服はティザービジュアルで着ているものや、色違いの松の文様の入ったパーカー、共通のデザインのツナギなど兄弟でお揃いなことが多いが、その着こなし方は様々で個性が光る。全員定職には就いていないが、最終話直前に家族に起こった出来事がきっかけで考えを改めるも緊急事態で白紙になる。全員車の免許は持っている（アニメ第三話にて）。なお、兄弟全員パチンコ好きだが、互いに監視し合っており、誰かが大勝ちしても他の兄弟が目ざとく見つけて勝った分を没収するので、勝ちが個人の懐に入ることは少ない。就寝時は横長の布団を6人で使用しているなど仲は良好だが、場合によっては兄弟であっても容赦の無い態度を取る。トト子に憧れているところは相変わらず。全員の一人称は基本的に「俺」もしくは「僕」で、場面によって使い分けていることも多い。6人全員童貞。

松野 おそ松（まつの おそまつ）

声 - 櫻井孝宏
長男。イメージカラーは   赤。6つ子の基本形とも言うべき容姿をしているが、無邪気な表情が特徴的。それゆえ、弟たちと比べて見た目を含めた個性がいまいち弱いことを気にしているらしく、「プレーン」と呼ばれると怒る（2期2話「超洗剤」）。他の兄弟に対しては基本的に敬称略。
小学6年生の頃の心を持ったまま成長した「奇跡のバカ」。パチンコと競馬を人生の楽しみとしており、下手の横好きながら釣堀にもよく訪れている。
計画性がほとんど無くいい加減でずぼらな性格 。自意識は梅干し程度の大きさ。弟たちと一緒の時は大口を叩くものの、意外に人見知りで、素の状態では一人で女性に声をかけられない（2期5話「夏のおそ松さん」）し、知らない相手と一緒だとプレッシャーに耐えられず逃げ出す（3期3話アバン「ぼんくらの時代」）。しかし、ここぞという時は、長男として個性の強い弟たちをうまくまとめるリーダーシップを発揮する。
その一方で頻繁に弟たちにちょっかいを出して苛立たせるなど、長男としての風格は無いに等しいが、思い悩むカラ松の相談に乗り温かい言葉を投げかけたり、失恋に嘆く十四松の背中を押すなど、弟思いの一面もある。
2期24話で父が体調を崩して入院したことを皮切りに就職と自立を意識するようになり、不安と向き合いながらラーメン屋でアルバイトを始める。

松野 カラ松（まつの カラまつ）

声 - 中村悠一
次男。イメージカラーは   青。太くキリッとした眉毛が特徴で、革ジャンにサングラスを掛けている。基本的に他の兄弟に対しては敬称略だが、稀におそ松に対しては「兄さん」と呼ぶ。トド松のことは呼び捨てか「トッティ」と呼ぶ。愚称は「クソ松」。
常にクールを気取って格好を付けているが、根は向こう見ずな熱い性格。極度のナルシストで自分をイケメンだと思い込んでおり、残念で痛い言動はトド松から「ナルシストを通り越してサイコパス」、おそ松から「オカルト」と評されている。扱いが酷く兄弟や母に発言を無視されるなど性格のせいで理不尽な目に遭うことも多く、特に一松からのアタリはキツい。実はメンタルが弱くガラスのハートの持ち主であり、1期2話でハローワークの係官に机を叩かれただけでビビりあがるほど。
自身の痛さを自覚する気配こそ無い（むしろイタいという意味を知らない）ものの「みんなのことを愛しているのに傷つける」と悩んだり、兄弟たちに優しい言葉をかけるなど、ある意味純粋とも言える心を持ち合わせている。
1期24話ではチビ太の家に居候し、履歴書の書き方を練習したりハローワークで土下座も辞さず本腰を入れて就職活動をしていたが、最終話でセンバツへの出場が決まった為、実家に戻る事になった。
2期24話では就職活動についての描写はないものの、自宅の本棚の「資格の取り方」に手を伸ばしたり、音楽仲間にからかわれながら、一松が手伝いをしているチビ太の屋台を訪れ、仲良く飲んでいる場面がある。

松野 チョロ松（まつの チョロまつ）

声 - 神谷浩史
三男。イメージカラーは   緑 。他の兄弟と比べて、黒目が若干小さめでくちが角張って御、後頭部の癖毛がない 。1期13話Cパートで、ある行為をおそ松に目撃され「シコ松」というあだ名を付けられた。それ以降、その話題で度々イジられ、「チョロシコスキー」「自家発電三郎」「シコティッシュフォールド」などと呼ばれるようになる。基本的に兄弟に対しては敬称略 だが、おそ松には「兄さん」と付けており、カラ松のことは敬称略の呼び捨てと、たまに「兄さん」付きの両方で呼ぶことがある。また上記の他、兄弟から「自意識ライジング」「ライジングシコースキー」などと呼ばれることもある。2期14話では、茶髪にしてイメチェンを図ったものの似合っておらず、そのことが元でおそ松・カラ松の兄2人から一松・十四松・トド松の弟3人が理不尽に叱られるという事態を引き起こし、最後は全裸ダイビング土下座で弟たちに謝るものの、3人から怒りの報復を食らっていた。
他の兄弟と比較して常識的な考えの持ち主で性格も真面目。それゆえにツッコミ役を担うことが多く苦労人でもある。EDでは6人の中で自分が1番まともであることを主張しているが、現状を打破できていないことから「6つ子の中にまともなのが一人もいない」と他の兄弟たちを叱っていることから、チョロ松も自分が世間から見るとまともではないことを自覚している。無職であることに唯一危機感を抱いているが、優柔不断であるため、意欲だけが空回りして結局職に就けないでいる。
アイドル好き（ドルヲタ）であり、コミケにも顔を出している（1期17話「十四松まつり」）。トト子がアイドルデビューした際は率先してマネージャーを務めた。お気に入りは地下アイドルの橋本にゃー。また、「背中をトントンしてもらう」ことと引き換えに、トト子にいいように使われるなど、「女性が絡むと途端にポンコツになる」と兄弟に評されている。
1期24話では父・松造から紹介された会社に就職が決まって社員寮に引っ越すことになり、6つ子の中で最初に自立することになる。これをきっかけに、他の兄弟達もそれぞれの道を歩み出すことになり、おそ松以外が実家を出て行く展開になるものの、1期25話でおそ松宛に投函しようとした手紙が自然発火で燃え、さらに松野家が「センバツ」への出場が決まったというおそ松からの報告を受けて、会社を退職して実家に戻ることになった。
2期24話では、松造の退院後、就職活動を再開するために、意を決した表情でハローワークへ向かう描写がある。

松野 一松（まつの いちまつ）

声 - 福山潤
四男。イメージカラーは   紫。常に半目で生気がなく笑顔も冷めており、髪の毛はボサボサで猫背。基本的に他の兄弟に対しては敬称略だが、おそ松には「兄さん」と付けており、トド松に対しては、呼び捨てか「トッティ」と呼んでいる。
マイペースな皮肉屋でしれっと毒を吐くことが多いため、兄弟たちからは社会でやっていけるのかと心配されている。無気力な上にぼそぼそと話す根暗な性格 かつ自虐的で、自らをゴミ扱いすることすらある。反面、何らかのスイッチが入ると思い切りのある行動を起こす。その他「戒め」等、自虐的な発言をする割に、他者が原因でピンチに陥ったり危害を加えられそうになったりトド松やカラ松ら他兄弟を蹴落としたり自分の都合が悪くなった時に前述の破壊力のある行動で、その場を切り抜けたり、うやむやにする爆発力を見せつける。
十四松の素振りのトレーニングに望んで付き合う一方、カラ松には冷たく接するなど、兄弟に自分なりの序列をつけている様子。
猫が友達で、自らも猫化する時がある。「（兄弟がいるから）友達は要らない」と言い放つほど排他的な性格だが兄弟同様女性に対する興味はあり、女体化したイヤミとチビ太に本気で入れ込んだ挙句、金を騙し取られた事実を知った際は容赦のない報復を行った。
1期24話ではほかの4人が家を出て行った後も、しばらくおそ松とともに実家に残っていたが、やがて自分も家を出ると告げて、着の身着のままであてもなく街を彷徨い、飢えと寒さで倒れそうになっていたところを、11話のブラックサンタの回で出会った若いカップルに助けられる場面がある。25話では路地裏で猫たちとともに過ごしている所に、おそ松が「センバツ」出場決定の報を持って迎えにきたため、実家に戻ることになった。
2期24話では松造の退院後、チビ太のおでん屋台を毎晩手伝っている。

松野 十四松（まつの じゅうしまつ）

声 - 小野大輔
五男。イメージカラーは   黄色。口を開けて笑っているような表情が多く、目の焦点が合っていない。また、後頭部の癖毛は一本だけ。普段から海パンを履いている。他の兄弟に対しては、上は「○○兄さん」、トド松には「トッティ」と呼ぶ事が多い。
いつも異様に明るくハイテンションな天然系バカ。何を考えているかが分からず行動も予測不能で、兄弟たちから「子どもの頃こんなんじゃなかったよね」と言われるほどの奇行癖の持ち主で、ティザーPVでも「明るい狂人」と称されている。ただし、誰にでもしっかりと挨拶を行うなど礼儀正しい一面も持っており、一人の女の子に恋をした際は純粋に相手を想う姿も描かれている。
無類の野球好きで、暇が出来ると自前のバットで素振りの練習を行っている。川を高速のバタフライで泳ぐ、78mの遠投記録を持つなど運動神経は全般的に高い。ホームレスの知り合いがいたり、こっそり株取引をやっている、コミケで「野球モノ」（本人曰く「BL」）の自作同人誌を販売する、などの一面を見せることもある。第23話「灯油」では、寒いと機嫌が悪くなるらしく、部屋のストーブの灯油が切れたとき、他の誰かが灯油を入れに行くのを寝たフリをしてずっと待っていたり、「あー、クソ寒い」などと普段では見られないような暴言を吐いていた。
1期24話では、チョロ松の就職に続き、アルバイト内定を機にデカパンに紹介された部屋で1人暮らしを始めたが、ある日、勤務中に右腕を負傷したらしく、腕に包帯を巻き三角巾で吊した痛々しい姿で帰宅して、デカパンに心配されるシーンがある。しかし、次の25話では自室にいるところに、おそ松から「センバツ」出場決定の知らせを受け、包帯を投げ捨て喜び勇んで実家に戻る。

松野 トド松（まつの トドまつ）

声 - 入野自由 / アクター - たじましんぺい（第2期第1話）
六男。イメージカラーは   ピンク 。兄たちより黒目が若干大きめでアヒル口など、愛嬌のある表情をしていることが多い。また、帽子をよくかぶっており、スマホを手にしていることが多い。愛称は「トッティ」。ほかの5人に対しては、ほぼ常に「～兄さん」と呼んでいるが、例外的に、2期7話では合コン時に無神経な発言をするおそ松に対して、また、3期5話Aパートでは、ドラッグストアの女性店員をめぐっての恋の宣戦布告でカラ松に対して、「兄さん」を付けず、呼び捨てで呼んでいた。
兄弟の中で一番コミュニケーション能力が高く、甘え上手だが、弟らしいかわいさを利用するなどあざとく腹黒い一面もあり「ドライモンスター」とも称される。20代になった現在でも夜中に一人でトイレに行くことができなかったが、一人暮らしをきっかけに克服した描写がある。
1期7話では、慶應大学の学生と詐称して若者に人気のカフェ「スタバァ」で働き始め、バイト仲間のアイダとサチコに合コンに誘われるなど、一時期「リア充」の仲間入りを果たしかけるものの、兄たちの妨害で失敗に終わっている。この回を皮切りに、怒りが頂点に達すると目を剥いて鬼のような恐ろしい形相を度々見せるようになった。
1期24話では、チョロ松の就職祝いの場をぶち壊した上に見送りもしなかったおそ松を、丸めた雑誌で殴りつけて喧嘩をし、その後チョロ松に次いで家を出て、一人暮らしを始めたが、25話で松野家が「センバツ」に選ばれたという連絡を受け、実家に戻ってきた。
2期24話では松造の退院後、どこかの会社に就職したらしく、作業着らしき上着を来たまま、同僚と飲みに行っている。

6つ子の派生キャラクター

一部のエピソードでは6つ子が設定を変えて登場することも多い。ここでは登場頻度の多いもののみ記載する。

F6（エフシックス）

1期1話、3.5話、11話、16話、18話、2期25話、3期10話、24話に登場。各人の名前や6つ子であることなどは通常と同じだが、乙女ゲーム風のスラリとしたキャラクターデザインとなっており、髪色がそれぞれのイメージカラーと同じものになっている。また、お互いを呼び合う時に「おそ」、「カラ」などと松を抜いた呼称を使うこともある。六つ子の長男にしてリーダー・さわやかジャスティス「松野おそ松」、肉を肉で巻いて食べる肉食系肉「松野カラ松」、ハーバード大学准教授・ビューティージーニアス「松野チョロ松」、カリスマ的求心力・ミステリアスクール「松野一松」、一万人斬りの王子様・スイートプリンス「松野十四松」、奇跡のルックス・キューティーフェアリー「松野トド松」からなる奇跡を起こすイケメン六つ子。私立おそ松学園に通う赤塚不二夫財閥に属する六つ子で、F6の「F」は赤塚不二夫のフジオ（Fujio）のイニシャルを指す。1期2話、18話などの一部のエピソードでは通常の六つ子がF6の姿に変身したり、F6の衣装を身につけることもある。2期第25話では地獄に登場し、通常の六つ子を助けた。

なごみ探偵のおそ松

1期8話、3期10話に登場。2000件以上の事件を担当したが、謎を解いたことは一度もなく、ピリピリしがちな現場の空気を和ませるのが取り柄の探偵。彼を取り巻く人物として6つ子がそれぞれ別人として登場しており、おそ松とは刑事時代からの旧知の仲であるチョロ松警部、事件を憎み現場で緊張しがちなトド松警部補、本編とは違って至って真面目な性格の十四松鑑識官といった警察関係者の他、バスローブ姿で殺害された事件の被害者であるカラ松、アイスホッケーマスクを被り血塗れの姿をした怪しい男性の一松が登場している。
なお、この「なごみのおそ松」を原作とした小説として、後述の『なごみ探偵おそ松さん・リターンズ』と、『おそ松さん〜番外編〜』収録の「なごみのおそ松」が存在する他、公式アンソロジーコミックや『マツモトキヨシ』のCMなどでも登場。
1期17話ではおそ松は登場しないが上記からトド松警部補のみ再登場した。さらに、ここでは一松が刑事、十四松が爆弾処理班と役割を変えて登場している。
3期10話ではおそ松が当初村人として登場し、後にカラ松を食べた犯人の人狼を突き止める探偵として正体を表したが、やはり和ませるだけで事件は解決しなかった。カラ松は同様に第一犠牲者としてバスローブ姿で殺害されているが、他の六つ子の役割が再び変更されており、トド松が占い師、チョロ松が裏切り者の偽占い師、十四松が村人、そして一松が人狼となっている。

じょし松さん（じょしまつさん）

1期13話、15話、18話、19話、2期5話、7話、8話、10話に登場。6つ子の女性版にあたるキャラクターだが、本来の6つ子とはそれぞれ別人の設定になっている。女性キャラにもかかわらず、対応する六つ子の声優がそのまま担当している。お姉さんタイプでまとめ役のOL「おそ子」、インストラクター風の容姿で肉体系の「カラ子」、オタクで腐女子の「チョロ子」、ロングヘアでミステリアスな雰囲気の「一子」、ガングロメイクで天然ギャルを装う「十四子」、森ガール風のゆるふわ女子の「トド子」からなる。喧嘩して仲直りした際に「私達はずっと友達よ」などのセリフがあるので、六つ子ではなく友人関係らしい。1期19話と2期7話では6人とも老婆の姿で登場。2期5話では十四子のみ登場しており、2期8話では十四子以外の5人がイルカトレーナーとして登場（六つ子は十四松のみ登場）、2期10話では一子と十四子が社員として、3期15話ではOL風の一子とトド子が、カラ松がバーテンダーを務めるバーの客として登場。

実松さん（さねまつさん）

声 - 小野大輔（十四松と同じ）
1期13話、18話、2期14話、25話、3期16話、24話と2期後半オープニング曲「まぼろしウインク」の映像に登場。凸凹商事という会社に勤める、うだつのあがらない30代独身のサラリーマン。会社では馬鹿にされているが、同僚の薫子からは心配されている。メロンパンを好み、朝食や昼食に食べている（1期13話、3期16話）。いつも就業時間が終わると残業を断って自分のアパートに早く帰宅している。2期までは「連続テレビドラマ 実松さん」の主人公という設定であるが、このドラマは第一話と第二話は存在せず、途中の話もとばされている。また、本編とは異なりリアルな画風となっている。
1期では第13話の「連続テレビドラマ 実松さん 第三話」に登場。この回では家に帰ると徳松（声 - 櫻井孝宏）、捨松（声 - 中村悠一）、菊松（声 - 神谷浩史）、平松（声 - 福山潤）、門松（声 - 入野自由）が待っていた。兄弟順は、実松が長男、門松が平松や徳松より上など、声優が同じ通常の六つ子と異なっており、各人の性格描写も通常の六つ子とは大きくかけ離れている。弟達は5人とも実松を兄として慕っており兄弟仲は非常に良いが、ラストでは心配で訪れた薫子が声がする明るい所を見ると5人はふっと消えてしまう。その後は「実松さん」第四話の次回予告という体で、新たに赤松、重松、常磐松という名前が挙げられている。18話では鍋型のカートに乗って登場し、ここで初めて通常の六つ子と共演した。
2期では14話の「連続テレビドラマ 実松さん 第九話」に登場。以前と変わらない暮らしをしていた所、交差点で交通事故を起こしてしまう。事故直前に彼の見た幻覚として「おそ松さん」本編のような世界の松野家が登場しており、彼もおそ松達兄弟の一員となっていた。画風も本編に準じたものに変貌しており、実松の顔だけはほぼそのままだが頭身が縮んでいる。実松のパーカーの色は茶色で、おそ松とカラ松のことを「兄さん」付き、一松と十四松とトド松のことは呼び捨てで呼んでいる他、チョロ松からは敬称略で呼ばれている。。この世界でのおそ松達六つ子は、性格描写が普段の本編とは若干異なるものになっている。実松は見知らぬ生活に始めは戸惑いつつも、おそ松達と一緒に暮らすうちに兄弟の一員として明るくなっていった。この回における「実松さん」第十話の次回予告では病院での入院生活の描写が描かれるものの、最後には「実松死す」とテロップが出され、それを受ける形で、2期25話では地獄で車に乗って再登場し、鬼たちに追われる六つ子を助けた。
3期16話では、前園により肉体に改造を施され、社畜AI「実（さね）コップ」として復活。しかし前述の事故の原因が前園の策略であることを突き止め、記憶と自我を取り戻した。その後、会社の最高経営会議に乗り込んで前園の悪事を暴露し、最後は社長を人質に取った前園を射殺した。その際自身を称えた社長に名を聞かれた際に、再び実松として生きることを誓った。

ちゃんとしてる松

2期1話に登場。過去の六つ子たちが未来の自分たちが働かずに有名になったので暴動を起こされたのを見てちゃんと努力した結果でなったキャラクター。おそ松は既婚者の立派な社会人、カラ松はサイボーグ人間、チョロ松は少女漫画風（この時トト子と魂が入れ替わっている）、一松はアメコミ風のヒーロー、十四松はコンピュータアニメーション映画的な3D、トド松は面を被った実写（アクター - たじましんぺい）になっている。それぞれロボットがあり、合体することで「チャントシター」になる。

絶対英雄チャントシター

合体ロボット。2期第1・2クールともにOPにも継続して登場しており、2期20話で再び登場した。こちらではイヤミロボットが街を破壊し始めたことを受けて、松野家の住宅がチャントシターに変形しようとするものの、変形の準備が長すぎたため、街がイヤミロボットによって壊滅状態となる。壊滅後もギミックは規則的に動き続けていた。2期25話では地獄でF6が操縦する形で登場し、霊柩車と合体した「ファイナルチャントシター」というパワーアップ形態へと進化した。

サマー仮面（カラ松）

2期5話と3期24話Aパートに登場。夏休みになると現れる、水着一丁で日焼けした肌の、ダンボールで作った太陽の仮面をつけた怪人。サマーを探し「○◯サマー」と点数を付けていく。必殺技はサマーフラッシュ。同話ED「イヤミ音頭」でも登場している。

げんし松さん

2期3話、4話、7話に登場。原始人の6人で「ウホ」しか言わない。全員顔に髭が生えている。カラ松はおでこと口の上に骨を載せ、一松は局部に葉っぱを付けている以外は裸で、十四松は全身毛むくじゃらになっている。3話ではマンモスの性行為を見て、木を切って局部につけると気持ちが良くなる筒をつくる。4話では自分達でつくった乗り物で速さを競っているとプテラノドンを発見、そのまま空中散歩を楽しんでいたら火山の火口に放り込まれた。7話ではまたマンモスの性行為を見て興奮し、雌のマンモス（声 - くじら）の肛門に飛び込み、現代でマンモスと共に化石として発掘された。

三国志さん

ナレーション - 矢島正明
2期7話に登場。三国志の3国に囲まれた小国「松」の国。おそ松の帝（みかど）を筆頭に、文官のチョロ松、軍師の十四松、猛将のカラ松、野蛮王の一松、若き才能のトド松がいる。天下を取ると勢いづくも本音はノリで「ぎょいー」と言いたかっただけの集団。赤壁の戦いで落ち延びた曹操（声 - 松本保典）と出会い、調子づいて赤壁の戦いの最中に飛び込むも、兵を率いず突撃したためあえなく玉砕する。

学生松

劇場版、3期23話に登場。高校生時代（18歳時点）の6つ子で、現在とかなり見た目や性格が異なっている者や、六つ子として一括りにされるのを嫌って個性を出そうとしている者がいる。おそ松だけは見た目、言動共に現在と変わらないが、カラ松は困り眉・そばかす顔でかなりのビビリ、チョロ松は丸眼鏡をかけ優等生を演じているが、テストは赤点でエロ本収集が趣味、一松は友人たちの前ではノリの良い陽キャラを出しているものの、無理をしているためにふとした時に陰キャラが出現する、十四松は目つきの悪い不良キャラで辺り構わずガンを飛ばしまくり、エア煙草やエアバイク（劇場版）、一人でエア喧嘩（3期23話）をしてなぜか負ける、などの意味不明な行動が目立つ一方、気を抜くと普段の天然な十四松に戻る、トド松は兄たちと比べて一人だけ体が小さく、ぶかぶかの学生服姿で兄たちにくっついて回っている極度の甘えん坊。

ウンコ松

3期1話に登場。アニメ再生工場で失敗して6つ子がウンコになった姿。体色はそれぞれのテーマカラーを引き継いでいる。これまでの事を反省し、アニメ製作委員会のモノリスに土下座して、3期には出演しないという約束の下で人間の姿に戻してもらったものの、新6つ子たちの新作映画お披露目の場に乱入し、暴動を起こした末に合体して巨大ウンコとなった。その後も怒りに任せて街を破壊し、自分達に説得してきた新6つ子を、頭にある触手の不意打ちで全員殴り飛ばした。

松野 一美（まつの いちみ） / マジック天使マジヘライッチー

声 - 福山潤
3期3話と24話Aパートに登場。水色の髪でもじゃもじゃしたショートカットの内気な中学生の女の子。ジュウシ先輩に恋心を抱いているが、声を掛けることも出来ずにいた。
突然現れた妖精（声 - 遠藤綾）から魚の骨を模した魔法のステッキを託されるが、心に潜んでいた陰気な心でヤンデレな性格の魔法少女マジヘライッチーに変身してしまい、ジュウシに憧れる他の女子中学生達（声 - 櫻井孝宏、中村悠一、神谷浩史、入野自由）を必殺技で惨殺し、ジュウシ先輩に血まみれのラブレターを渡した。

ジュウシ先輩

声 - 小野大輔
3期3話に登場。常に白馬に乗っている一美の憧れの先輩で、笑顔が似合う金髪の美形男子。彼を慕う取り巻きの女子中学生達に囲まれている。
一美がマジヘライッチーに変身して彼の目の前で女子中学生達を惨殺しまくった後、彼女から血まみれのラブレターを渡されるが、その恐怖のあまりに逃げ出してしまう。しかし魔法の力で回り込まれ、チェーンソーを掲げる彼女に行く手を阻まれてしまった。

話によって、原作・前作までのアニメと同様に様々な役回りで登場する場合もあるが、登場してもセリフがなかったり、1シーンのみという場合もあるなど出番は少なめになっている。

イヤミ

声 - 鈴村健一
原作および前作より頭身が高くスリムな体型になった。嫌味でうさんくさい性格は変わらないが、今作では数少ない常識人キャラとなっており、ツッコミに回ることも多い。実際に行ったことは無いにもかかわらず「おフランス帰り」を自称している。反面、主役を取るためなら手段を選ばない、人助けするにお金を要求する等、非道な一面も見せる。
六つ子とは幼少の頃から親しい仲だが、お金を無心されるなど被害に会うことも多い。
原作と同様に様々な設定で登場しており、ある意味本作品の「スターシステム」を最も体現している存在。前作ではチビ太と共に実質的に主役のような存在だったが、今作では主演回以外、基本的に脇役となっている。
1期の開始当初は、二階建ての家に住んでいて、自家用車も持っていたが、ハロウィンの仮装をしてイヤミの自宅に押しかけたおそ松たち六つ子に「トリックオアトリート」と連呼されながら家の骨組みと畳一畳、自分自身のはいていたパンツ以外すべて分捕られたことがあった。6話以降は暫く無職となり、橋の下で寝泊まりしたり公園の噴水で行水、さらには猫と道端に落ちたおでんを取り合うなどのホームレス 生活をしたりしているが、固定した設定ではなく、エピソードによって家や車、職業があったりなかったりする。そのため、生計を立てるために職を転々とするも、自身の不始末がたたって廃業・解雇されざるを得なくなり、ボロボロになって松野家に転がり込んだり、その後、何事も無かったかのように元の家が建てなおされたり、ドブスと同居していたりする。
1期6話Bパートでは、イヤミのトレードマークの出っ歯は1京億円程度の価値を持つレアメタルであることがデカパンの研究で明らかになり、さらに、彼の頭の中に出っ歯のスペアがロール状に収納されていて、ほぼ無限に再生可能な仕組みになっていることが発覚した。
「定番」のギャグでもある「シェー」は4話のアバンタイトルにてダヨーンと共に練習している描写が描かれた。
3期9話では、十四松に乞われて、「シェー」の存在や意味を知らないAIのオムスビたちに「シェー」を教えることになるが、オムスビたちに「60年以上前のギャグで現在の人々が笑う確率は0.1」「そもそもシェーというギャグにどのような意味があるのか」などとさんざん問い詰められた挙句、ついには「僕たちはシェーとは何なのかを知りたいだけで、シェーのやり方を教えてもらいたいわけではない」とまで言われたショックで精神が崩壊し、旅に出るという書置きを残してどこかへ去ってしまった。
原作『おそ松くん』での漢字表記は一貫して「井矢見」であったが、2期11話に登場した自宅には「伊矢見」という表札が掛かっていた。3期9話に登場した自筆の書置きの署名は「井矢見」となっている。

ロボイヤミ

1期18話に登場。自ら主催した主役争奪カートレースで主役の座を取り戻すべく、ロボットに変形したイヤミ。おそ松と死闘を繰り広げるが、その隙に聖澤に追い抜かれてしまい、おそ松と共に燃え尽きた。

盗人

2期18話に登場。戦争で両親を亡くした盲目の少女・菊を引き取り、彼女の病気を治すべく奮闘している。この回は原作と同様に主役として登場しており、この回のエンディングではキャストの順番ではイヤミが一番先に表示されている。

チビ太（チビた）

声 - 國立幸
原作・前作より頭身が高くなったが小柄な体格という設定は変わっていない。服装や性格、独特のべらんめぇ口調などは前作を意識しており 、口癖の「てやんでぇ、バーロー、チクショー」も引き継いでいる。様々な仕事を持っており、大好物であるおでん の屋台 を営業している 。ただし、おそ松たちから代金を払ってもらうことはほとんどなく、ツケが膨大な額になっている。2期以降はハタ坊との絡みが多くなっている。
カラ松を誘拐して身代金を要求したが全く相手にされずあきらめている。おでん作りに関しては職人気質を通り越して狂気の域に達している節もあり、最後の味見の工程で素っ裸でおでんの中へダイビングしたこと もあった。夜中に多くのツケの額の入っている六つ子達におでんを食べさせ、翌朝には支払わなかった六つ子達に激怒して襲い掛かるも、チョロ松の頭に噛みついた際にトド松以外の六つ子達に引っ張られて十四松が間違えて頭の毛を抜いたため、イヤミ・ダヨーン・デカパン・ハタ坊に金を支払って六つ子達に情け無用の報復と頭突きを与えたこともあった。しかし翌朝、一本毛の無くなっている事をトト子に「可愛い」と褒められ、本人も気に入った。翌話から頭の毛は復活しているが、トト子とにゃーによる乱闘で毛が再び抜けてしまった（それでも翌話で復活している）。
3期3話では、AIのオムスビたちにおでんの腕前を評価してもらい、高い評価を得られたものの、「「チビ太」という呼ばれ方は蔑称では」というAIたちの空気の読めなさが原因で失神してしまう。

松野夫妻

1期4話より登場した六つ子の両親。六つ子が大人になったため少し老けた容姿になっている。成人でありながら定職に就かずニート生活を続けている息子達を心配して、様々な手段を用いて、自立するようにプレッシャーを掛ける。初登場の回では結婚歴二十余年にして方向性の違いというバンドのような理由から離婚すると言い出し、松造が家を売り払うと宣言したため、家での安穏としたニート生活を続けたい六つ子を焦らせたものの、普段は夫婦仲も良く、息子たちを含め家族8人で仲良く暮らしている。1期では脇役だったが、2期からはメインの話が多く作られるようになり、出番も増えていった。フルネームに関しては初登場回で記入した離婚届に記載しているが、1期の公式サイトおよびクレジットでは、「おとうさん」「おかあさん」表記となっている。2期以降の公式サイトおよびクレジットでは「松造」「松代」表記になっている。 松野 松造（まつの まつぞう） 声 - 井上和彦 六つ子たちの父親で、おそらく松野家唯一の稼ぎ手。「松松商事」という会社に勤めているが、まともと思えるような仕事はしておらず、奇怪な行動ばかりしている。現在でも妻の松代に好意を抱いている。2期16話で六つ子や松代と共にチビ太のおでん屋台を訪れた時は、チビ太に対して当たり前な事（屋台にもかかわらず寒い、辛子が辛い）を指摘していた。2期24話では体調を崩して入院するも、命に別状はなかった。このことが六つ子達が一時的に自立を意識するきっかけとなったが、25話の六つ子の葬式の時は、松代共々自立の件を忘れていた。 松野 松代（まつの まつよ） 声 - くじら 松造の妻で六つ子の母親。髪型など全体的な見た目は年相応になっているものの、原作・前作より身長はやや縮んだが細身で丸い眼鏡を掛けているところは若い頃と同じ。六つ子の事はまとめて「ニートたち」と呼んでいる 。なかなか働こうとしない息子たちに対し、唐突に扶養家族選抜面接を開いたり、ニート矯正施設に六つ子の誰かを入所させようと考えたりするなど時々、厳しい姿勢を見せる時があるが、基本的には息子たちへの愛情の方が強いようで、結果として六つ子たちを家から追い出したりせずに世話をしてやっている。スペシャルAI・スケロクのファンであり、スケロクの生写真セットと引き換えに、オムスビたちに松野家でのエネルギー充電を許可する密約をいつの間にか取り交わしていた。

松野 松造（まつの まつぞう）

声 - 井上和彦
六つ子たちの父親で、おそらく松野家唯一の稼ぎ手。「松松商事」という会社に勤めているが、まともと思えるような仕事はしておらず、奇怪な行動ばかりしている。現在でも妻の松代に好意を抱いている。2期16話で六つ子や松代と共にチビ太のおでん屋台を訪れた時は、チビ太に対して当たり前な事（屋台にもかかわらず寒い、辛子が辛い）を指摘していた。2期24話では体調を崩して入院するも、命に別状はなかった。このことが六つ子達が一時的に自立を意識するきっかけとなったが、25話の六つ子の葬式の時は、松代共々自立の件を忘れていた。

松野 松代（まつの まつよ）

声 - くじら
松造の妻で六つ子の母親。髪型など全体的な見た目は年相応になっているものの、原作・前作より身長はやや縮んだが細身で丸い眼鏡を掛けているところは若い頃と同じ。六つ子の事はまとめて「ニートたち」と呼んでいる 。なかなか働こうとしない息子たちに対し、唐突に扶養家族選抜面接を開いたり、ニート矯正施設に六つ子の誰かを入所させようと考えたりするなど時々、厳しい姿勢を見せる時があるが、基本的には息子たちへの愛情の方が強いようで、結果として六つ子たちを家から追い出したりせずに世話をしてやっている。スペシャルAI・スケロクのファンであり、スケロクの生写真セットと引き換えに、オムスビたちに松野家でのエネルギー充電を許可する密約をいつの間にか取り交わしていた。

ハタ坊（ハタぼう）

声 - 斎藤桃子
前作同様、オーバーオール姿で登場 。なお、原作および前作まではチビ太とほぼ同じ大きさだったが、今作ではチビ太より大きくなった。「ダジョー」と言いながら走り回る姿やボーッとした性格は原作および前作までと相変わらず。子供の様に見えるが、アフリカ人並の男性器を持っており、チョロ松に「ずいぶん成長したね」と言われ、9話ではレンタルビデオ 店の18禁コーナーに一瞬だが、登場してるなど彼もやはり大人である。
情報商材の商売で大成功を収め、大企業の社長になった。秘書や執事達からは「ミスターフラッグ」の愛称で親しまれているが後に会社経営に何も貢献していないと指摘され、社長の座を追われた。その後、河川敷や街中で得体の知れない肉を使って始めたケバブやハンバーガーの移動販売や焼肉屋で成功を収め、再び大富豪に戻っている。2期以降はチビ太との絡みが多くなり、大富豪以外にも他の役職に付く事がある。

デカパン

声 - 上田燿司
パンツの色は前作とほぼ同じで、前作より少し老けたデザインになり、目尻に小じわがある。猫が好きでのんびりした性格 。パンツから色々な物を出すところも相変わらず。1期7話でダヨーンと共演して以降は親友関係。「故郷の味」と言うほどに芋煮が大好物。味付けは醤油派で、「味噌派」と聞いた際は、赤鬼のような憤怒の形相になった。

DEKAPAN-MAN

1期3話に登場。「ほれいけ!DEKAPAN-MAN」の主人公。お腹を空かせた少女トト子や囚人にいじめられたチビ太を助けるために、パンツから物を出すたびに警察官に扮したおそ松に撃たれるのが定番。マントの色は地上波版では赤だが、BSジャパン版では水色となっている。初放送版のみの登場で、再放送版やDVD・BD版ではカットされている。

デカパン博士

1期5話で初登場。研究所の所長であり、白衣を着ていることが多いが着ていない場合もある。原作と同様に様々な薬品や機械を作るが、それが騒動の原因になる事が多い。他にもイヤミの出っ歯の原理を「イヤメタル」と名付けたり、十四松の就職先の上司になったりする。

ダヨーン

声 - 飛田展男
原作・前作より頭身が高くなり、前作同様、背広姿に革靴を履いた姿であらゆる場面に登場している 。基本的にのんびりした口調で「…だよ～ん」という語尾で話すのが特徴。しかし、ごくまれに激昂すると、語尾に「だよ～ん」と付けずにドスの効いた声で恫喝するような口調になる（3期17話など）。掃除機のように何でも吸い込む特技があり、体内には「ダヨーン族」が住んでいる。さらに口からは「ファイナルダヨーン」という強力な光線技を放つなど、ある意味人間離れしている。トド松と披露したデリバリーコントによると、口が大きいのは遺伝らしい。7話でデカパンと共演して以降は親友関係。「ダヨーン相談室」ではおそ松とカラ松の相談相手として登場した。

トト子（トトこ）

声 - 遠藤綾
本作のヒロイン。前作まではサロペットスカート姿であったが、今作では濃いピンクのセーターとチェックのプリーツのミニスカート姿がベースとなる。髪型は原作同様おさげだが、髪を伸ばすと目が隠れるほどのロングヘアであり、髪の色も焦茶色に変更された。原作でも見られた男勝りで勝気な性格は相変わらずで、更に前作で見せた腹黒さに加えナルシスト、傲慢さも追加され必要とあらば暴力に訴え「ボディブロー」を得意技とする。前作でほとんど描かれなかった実家の魚屋は大繁盛しており、父親（声 - 利根健太朗）の愛車はベンツ（左ハンドル）である。母親（声 - 斉藤貴美子）はフォックス型の眼鏡をかけている。免許を取得はしていない。
1期4話では魚屋の宣伝も兼ねて、弱井トト子（よわいトトこ）名義でアイドルデビューしたが、魚介類 のコスチュームを着て歌うマニアックなステージのため、六つ子以外は固定ファンも付かず、ほとんど売れていない。トト子を利用して儲けようとしたイヤミからも「儲かる気がしない」と匙を投げられている。
アイドル活動こそしているが、定職についてはおらず、副業や就学もしておらず、家業の魚屋を手伝っているような明確な描写もない。
六つ子及びレギュラー陣とは腐れ縁を続けており未だに全員から好意を持たれているが、全員相手にしていない。普段は六つ子を「〜君」呼びしてるが怒ると「ニート達」「クソ」と見下す。他のレギュラーは呼び捨て。
ストレスが極限状態に溜まると冷凍倉庫にある冷凍マグロをサンドバッグにして殴りまくる。ただ自分がこの世で一番可愛いと信じているので「嫉妬」と「コンプレックス」という言葉を知らない。第1期第24話で石油王と結婚するが「魚臭い」と言われてブチ切れて破局。その後、シンガポールに留学するが、程なくホームシックになって帰ってきた。
2期24話では、松造の入退院後、「ちゃんとすること」と「自分らしくいること」の間で悩むおそ松の弱音を聞いてやり、辛口の言葉を掛けながらも励まして、おそ松にある決断をさせるという、本作のヒロインらしい振る舞いを見せた。
『えいがのおそ松さん』では、高校時代は橋本にゃーから尊敬される先輩後輩関係であった事が明かされた。
第3期第3話では評価値で、AIロボット達から「働いていない」「わがまま」「悪い人」などの理由から、総合評価を「ウンコ」とされた怒りで、AIたちを連れてきたカラ松、チョロ松、トド松を自宅のマグロの冷凍庫に吊るしてチェーンソーで切り刻むという制裁を行った。それ以来オムスビ達を苦手にしていたが、24話で彼らがA1グランプリのファイナルに出場した際には応援するなど関係も良くなっている。11話ではオムスビに再びアイドルとしての自分を評価してもらったものの、魚類系の衣装はすべて酷評され、最後に着装した橋本にゃーから薦められた猫モチーフ衣装に「100万点」の高評価が出たことにより激怒し、おそ松とカラ松に対してボディーブロー一発で消滅させた。
また、かつての後輩で今はアイドルとして目の上のたんこぶである橋本にゃーの子供の子守りを時々するようになった。

聖澤 庄之助（ひじりさわ しょうのすけ）

声 - 上田燿司
1期2話冒頭のチョロ松と十四松のデリバリーコントで初登場した謎の男。同話Bパートのラストでは「NEWおそ松兄さん」となっていた。1期3話の「銭湯クイズ」以降もモブキャラクターとしてたびたび登場し、1期7話の「北へ」ではじめてセリフ付で登場した。
また主役を演じた1期19話冒頭の「しどう 聖澤庄之助さん」にて、慎之助、鈴之助、左之助、伝之助、由良之助、りん之助、とも之助、くら之助、あい之助、もん之助、てつ之助、はる之助、じゅん之助、えい之助、しか之助、のぼり之助という同じ顔の弟たちを持つ17つ子の長男であることが明らかになったが、他にネタがないという理由で打ち切りとなった。この17人は後に1期25話にも登場している。
顔の造形そのものは、「ボーイズライフ」に1965年7月号から同年12月号まで連載されていた作品『いじわる教授』の主人公と同一である。また、赤塚公認サイト「これでいいのだ」では鼻がないものの「カムカムホテルのオーナー」というキャラクターが『おそ松くん』のキャラクターとして記載されている。

橋本にゃー（はしもと にゃー）

声 - 山下七海
1期2話Bパートで初登場。チョロ松のお気に入りの地下アイドルだが、自身はチョロ松をファンとして全く認識していない。赤系の制服姿に猫耳 や猫の手のグローブなどを装着し、ネコを前面に押し出したキャラクターのコンセプトで活動をしている。愛称は「にゃーちゃん」。中学時代は黒髪の地味な容姿で、赤塚高校のマドンナ的な存在であったトト子にファンレターを渡すほど憧れていたが、現在彼女とはアイドルとしてのライバル関係にあり、顔を合わせると辛辣な口調で言い争いを始める。1期24話ではイケメンIT系の彼氏（声 - 上田燿司）と婚約し、この際に地下アイドルも引退したが、1期25話での「センバツ」出場の松野家チームの応援（チアガール）として再登場、次の年には選手としてチームに参加していた他、2期では何事もなかったように地下アイドルに復帰して、しばしばチビ太のおでん屋台で、トト子と一緒に一杯やっていた。おそ松とチョロ松以外の6つ子とは絡みが少ないにも係わらず、2期25話の6つ子の葬式に参列し、6つ子全員を悼んでいた。
3期ではIT実業家とは既に離婚して、シングルマザーとしてアイドル活動を続けていたことが判明。アイドルとしての活動に限界を感じ、トト子に話を持ち掛けて、女子プロレスのヒール役としてコンビを結成。チョロ松は彼女達の変貌を見て唖然とした。18話では、公園で赤ちゃんが転倒してしまうところを、おそ松に助けられたことがきっかけで淡い想いを抱くが、トト子や他の六つ子など周囲から猛反対を受けて意地になった上に、自身の発言にチョロ松がショックを受け、海外に失踪する原因を作ってしまう。その後、おそ松とデートをすることになるものの、デート当日の朝、目覚めるのと同時に冷静になり、思い直して待ち合わせ場所の公園でおそ松に謝罪し、自ら断りを入れた。25話ではドブスや赤ちゃんと共に花見を見に行っていた。

ドブス

声 - 斉藤貴美子
1期15話Bパートで初登場。名前の通りドブスな見た目をしている。 原型は原作『おそ松くん』の「チビ太の花のいのち」にてイヤミが欲をかいて誕生した花の精だが、キャラクターデザインは異なっている。2期25話では地獄で彼女の顔に似た獄卒が大量に出現しており、映画では6つ子やトト子たちと同期の赤塚高校の生徒の一人として登場。

花の精

1期15話Bパートに登場。枯れそうな花にカラ松が酒を注いだことで現れカラ松の彼女になり、彼からは「フラワー」と呼ばれていた。原作とは元になった花が異なる。

イヤミの彼女

2期11話で初登場。イヤミの家に同居しており、第3期ではベビーシッターとして橋本にゃーの子供の世話をしている。

オムスビ（シャケ / ウメ）

声 - 山本和臣
3期2話から登場。独立行政AI研究所からお届け物として松野家に配達されてきた2体の双子AI ロボット。6つ子の肩口位の身長で、ネクタイの色がシャケはサーモンピンク、ウメは紅色という違い以外は全く同じ形状をしている。声にも若干の違いがあり、シャケは甲高くハイテンションな声、ウメは低めでローテンションな声をしている。高い知能と性能を持ち、掃除・料理・洗濯などの家事全般をこなし、競馬のレース予想、マッサージ、将棋の相手、ライブの応援、VRの提供など多方面で能力を発揮する他、「コンプライアンス機能」も内蔵している。エネルギー（電力）が足りなくなると、正座した状態で、家庭用電源からバッテリーを通して充電する（プラグはお尻にある）。
最初は6つ子達も訝しんでいたものの、やがてAIたちが見せる能力に感心、あるいは満足し、更に彼らが「ニートの何がだめなのでしょうか？」と、ニートであることを容認する発言をしたことに喜び、一松以外の6つ子は一気にうち解けて仲良くなった。基本的に日中だけ松野家に来ており、夜になると、研究所のような所に戻って、その日に蓄積したデータをメインコンピューターに移しているかのような描写があり、その本来の目的は不明。ただし、5話Aパートでは、夜更けに松野家の縁側で、一松、十四松とともにトド松の一目惚れの相手の話題に2体揃って耳を傾けていた。時折「気に入られないと」と呟いている。頭を撫でられると喜ぶ。
当初名前が無かったため、3期2話のエンディングでは「AIロボ」と表記されていた。その後、同話Cパートにておそ松から適当に「オムスビ」、それにちなんでネクタイの色から「シャケ」と「ウメ」と命名された。
物事を評価値で評価検証することが可能。あくまでも客観的なデータ等から科学的に検証・評価を行うが、人間の個性・感情や言葉の裏の意味などの曖昧、微妙なニュアンスをまだ完全には理解できていない部分がある。そのためか、正論ではあるが登場人物が答えに困ったり、不快になる質問や意見、評価値を出してしまい、しばしば相手から怒りを買うなどの迷惑をかけることがある。ボイス機能付きで一度聞いた声の完全再現が可能。
6つ子に好印象を与えるべく献身的にお世話するが、「コンプライアンス機能」に引っかかるような命令が多いおそ松には基本的に従わないため、おそ松が完全にAIにハマることはない。一方で、最初から距離を置いている一松には自ら近づき、「最適化」の機能を駆使して町内の猫の居場所のデータを提供し仲良くなろうとするものの、彼から礼を言われつつも「もう、いいから」と告げられ、去られてしまった。
12話ではサポートAIとしての評価値が下がり過ぎで、スペシャルAIのスケロクと交代する形で降板した。その後、解体工場に異動して働いていたが、探しに来た六つ子に助けられ、二体とも自我に目覚めて「ニートAI」として覚醒したものの、興奮の余り暴走し、あたり構わず破壊の限りを尽くしたため、そのままバス停に置き去りにされた。以降は自主的に松野家に入り浸るようになり、以前のように命令されても「自分たちでやってください」と答えたり、「シェー」をしてはぐらかし、充電のためだけに来ているなどと憎まれ口を平気で叩くようになった。
14話以降は、AIたちの漫才の祭典という「A-1グランプリ」の本選出場や入賞を目標に、若手漫才コンビのような日常を送っている。14話Cや19話Aパートでは、ファミレスでネタ作りを行っている様子が描かれ、主にウメがネタを考えてツッコミ、シャケがボケという役割分担があるようだが、17話Aパートで一松とトド松の前で披露した新ネタでは、どちらがボケでツッコミなのかはあまり明確ではなく、しかも人間のAIに対する感情や扱いを揶揄するような内容であったため、一松とトド松を怒らせて、なぜか松野家の裏庭にある落とし穴（舞台でいう「奈落」）に2体とも落とされた。
24話では「A1グランプリ」のファイナル（8組）に進出。緊張の余り楽屋や廊下でオイルを吐きまくるかたわら、出場順・前のコンビが滑った場合・爆発的に受けた場合など様々な状況に応じたネタのパターンを計算し、必勝のアルゴリズムを形成するなどの準備して本番に臨む。しかし、本番を始めてほどなく、観客や視聴者の反応から「滑っている」ことに気が付き、追い詰められた結果、「ギャグAI」として覚醒。口や手から出したアンテナから、脳を揺さぶり笑いの中枢を刺激するような電波を発信し、日本中を強制的に「笑わせた」結果、見事優勝を勝ち取る。しかし、「あれは漫才ではない」「洗脳ではないのか」「コンプライアンス違反」などの批判殺到で、「A-1グランプリ」は今季限りで無期限番組休止（「打ち切り」）となり、オムスビたちの優勝も剥奪となった。
監督の藤田からは「2体の演技はあまり変えないでいい」という指示を受けていたが、担当声優の山本は「シャケはポジティブで若干テンション高め、ウメはオーソドックスなAIらしい聞き取りやすい喋り」と、2体のキャラクターを演じ分けている。

2015年11月5日、『おそ松さん』の公式HP上で「製作委員会の判断」により第1期第1話をBD・DVD第1巻に収録しないことが発表された。また、各種動画サイトでの対応についても触れられており、2015年11月12日をもって第1期第1話は配信終了となった（ニコニコ動画内の「公式アニメ」では、当面1話のみの無料配信を継続する予定であることが発表されており、GYAO!においては2016年4月まで配信予定だった）。発表では理由は明らかにされていない。なお、2016年4月以降にネットされる地上波の局やキッズステーションなどのBSやCSで第1期が放送される場合は第1話は放送されず、第2話から放送開始となる。

第1期第1話未収録の代わりに、BD・DVD第一松（第1巻）には代わりに未放送回“ 「松汁」「童貞なヒーロー」 ”を収録、ソフトメディアの各巻には新作ショート映像が収録された。

「こぼれ話集」では9本のショートアニメが放送されたが10月20日に地上波およびAT-Xで放送されたのち、10月25日のBSジャパンでは『それいけ!アンパンマン』のパロディ部分などが修正されて放送された。これについてテレビ東京の髙橋雄一社長は「オリジナルに失礼な行為だった」と説明した。

第1期第1話同様、「製作委員会の判断」によりBD・DVD第一松ではアンパンマンのパロディは未収録となった。アンパンマンのパロディの代わりに「リアル松」を収録された。各種サイトでの配信も2015年11月24日でアンパンマンのパロディはカットされた（なお、2016年4月以降にネットされる地上波の局やキッズステーションなどのBSやCSも同様で、当該の話とリアル松を除いた内容で放送される）。

第1期第1話はパロディネタと下ネタ満載だったが、放送されると六つ子に「萌える」女性が続出し、Twitterやpixivには本作のイラストが多数投稿された。

おそ松さんの放送期間中にあたる2015年11月末からアニメイト池袋本店で行われた企画展「おそ松さんミュージアム」は、開店前から2000人ほどの行列ができるほどの大盛況をおさめた。その際、スポーツニッポンは女性鉄道ファンを「鉄子」と呼ぶことになぞらえ、本作の女性ファンを「松子」と呼び始めたが、この呼称には女性ファンから批判が殺到した。その一方、六つ子たちのファンを意味する「おそ松girl」「カラ松girl」など、「〜松girl」と自称する女性ファンが増えていると、まんたんウェブは報じている。

アニメージュの編集長である川井久恵はこの状況について、2015年秋から2016年冬にかけてのアニメ業界全体への盛り上がりにつながっているわけではなく一人勝ちに近い状態だとしており、一部の編集者からはアベノミクスをもじって“マツノミクス”と呼ばれていた。

本作を特集した雑誌類が軒並み売り切れが続出し、代わりに電子書籍版を購入するファンも多数見られる。また、アニメ関係のフリーライターの渡辺由美子は主要キャラクターの声優に人気男性声優を起用したことも女性ファンの心をくすぐった大きな要因であると評している。

テレビ東京アニメ制作部の土方真は、東京新聞のインタビューの中で「当初から「いける」という見通しは全くなかった。ターゲットが明確な作品が多い中、人気声優が採用されていたものの誰をターゲットにしたのかわからない印象があった」と述べ、このような予想外の反響は喜ばしいものだとしている。また、インタビューに同席していたアニメ事業部の広部琢も「ターゲットが不明確なのはビジネスとしてはかけかもしれないが、キービジュアルがポップな雰囲気であるため印象に残るだろうし、間口の広い作品だったがために広い支持を得られたのではないか」とみている。

漫画家の倉田真由美は本作の人気について、「モテる男性像が変わってきている。身近にいそうな『おそ松さん』は、今の若い子にとってダメダメなんだけれども元気をもらえる存在になっている」と分析している。

月刊アニメ雑誌「アニメディア」の馬渕悠編集長は、女性のアニメ視聴者がイケメンの登場するアニメに疲れたことが一因ではないかと推測しており、馬渕編集長のコメントを掲載したまんたんウェブもシンプルな作画のギャグアニメであるがゆえにイケメンが登場するアニメよりも作画崩壊が起きにくい分、ファンも安心して見られるのではないかと評している。

音楽評論家の石黒隆之は本作のサウンドトラックについて、「『おそ松さん』のアニメも漫画も見ていないが、何でもありの音楽の大図鑑ともいえるほどの内容で、最初から最後まで楽しませてもらった。」と評し、「2枚目の26番目に収録されている「実松さん」とその次の「十四松と概念」を聴き比べて、同一のメロディを基にしていても、調やリズムパターン・楽器構成等が異なると全く別の曲のように聞こえるということを改めて知った」とも述べている。

第1期2クール目の開幕となる第13話の各パートは、いずれも実験的な内容から視聴者の間でさまざまな反響を呼んだ。

Aパート「連続テレビドラマ 実松さん 第三話」は、これまでとは異なるリアルな作風やショッキングな結末が視聴者の間で話題となり、声優情報ウェブサイト・ボイ☆スタは第13話のレビューの中で、このパートを制作陣からの挑戦状とみたと述べている。また、ボイ☆スタはこのパートのメインキャラクターだった実松がアダルトゲーム『遺作』のキャラクターに似ていることを指摘し、同作の原画を務めた横田守が第13話に関連するイラストを投稿したことを報じている。

Bパート「じょし松さん」は、6つ子を女体化したキャラクターたちが居酒屋で話し合う内容でありながら、6つ子を演じた男性声優たちが彼女たちを演じたことも話題となり、ボイ☆スタは「まさに公式が最大手」と評した。また、アニメイトTVは女性の視聴者から「女の嫌なところがすべて出てきた」、「私もこのように気持ちを吐き出したい」といったキャラクターへの共感が多数寄せられ、再登場を望む声も上がったことを報じた。

Cパート「事故?」は、チョロ松の一人遊びをおそ松がからかったことに端を発した6つ子たちの大喧嘩を描いた内容であり、ボイ☆スタは生々しいテーマだったと評した。一方、アニメイトTVは視聴者から「翌朝に元の関係に戻っているのが良かった」「6つ子たちの日常が見られた」「今まで描かれなかった側面が描かれたことでさらにキャラクターに興味を抱けた」といった好意的な反応が寄せられたことを報じた。また、この回は番組名こそ書かれてはいないが、行為を兄弟に見られてからかわれるというネタだったことから、BPOに苦情が入った。そして、一部の視聴者がNHKのニュース番組『NEWS WEB』のミニコーナーの一つでTwitter上の流行ワードを取り上げる「つぶやきビッグデータ」に「シコ松」を乗せようとする動きもあったが、実際の放送では「松さん」が表示された。

第1期最終回である2016年3月28日の放送1か月前からネット上では番組終了を惜しむ声が上がり、「松ロス」「松鬱」という言葉がネット上に現れるほどだった。

2016年3月29日1時35分 - 2時5分（28日深夜）放送の最終回では、自己最高となる平均視聴率3.0%（ビデオリサーチ調べ、関東地区・世帯、以下略）を獲得し、占拠率も21.8%を獲得した。

2015年12月10日には、同時期放送の『ヤング ブラック・ジャック』第11話のエンドカードで漫画家の田中圭一による本作風のパロディイラストが公開され、ヤングチャンピオン編集部が公式Twitterで謝罪した（詳細はヤング ブラック・ジャック (漫画)#テレビアニメを参照）。

『おそ松さん』のBD第1巻は発売1週目で3.6万枚の売上を記録し、日本のオリコン週間BDランキングのアニメ部門で1位を獲得した。また、同日に発売したDVDについても4.3万枚を売り上げて週間DVDランキングのアニメ部門で1位を獲得し、アニメ部門での同時首位を達成した。 続く第2巻も第1巻と同様に、BD・DVD双方で週間ランキングの1位を獲得した。

また、『おそ松さん』の大判ポスターを付録とした月刊アニメ雑誌「PASH!」の2016年1月号は大きな反響を呼び、発売の5日後には発行部数の6万部を完売したため緊急重版が実施された。その後、「PASH!」の2016年2月号においては発売前から重版が決定するなど異例の事態となっている。また、本作を表紙として特集を行った「アニメージュ」の2016年2月号においても売り切れ店舗が続出し、テレビアニメ『機動戦士ガンダム』の「マチルダ・アジャン」が表紙を飾った1980年3月号以来、約36年ぶりに重版が行われた。ピンナップやクリアファイルを付録にした「アニメディア」「オトメディア」の2016年2月号も同様の経緯から重版されることとなった。

『おそ松さん』の人気により、原作『おそ松くん』にも若い層が興味を持つという現象も発生しており、eBookJapanでの電子書籍版の売上は前年（2014年1月 - 12月）対比で80倍にものぼった。これを受け、「eBookJapan」の運営元であるイーブックイニシアティブジャパンは、原作全34巻セット半額かつ1巻無料キャンペーンを2016年1月14日まで延長した。また、チバテレは本作の大ヒットにあやかり、第2作の再放送を2015年11月27日から開始することを発表した。

『おそ松さん』はニュースサイト「アニメ！アニメ！」が行ったアンケートにおいて、2015年素晴らしかったアニメ総合4位を獲得した。

『おそ松さん〜The Game〜（仮）』の予約を2016年5月13日にAmazon.co.jpにて開始した所、2016年5月14日正午時点でAmazon.co.jpのゲームの人気度ランキングの1位から14位までを独占するという事象を記録した。

2016年5月7日に発売された『おそ松さん Original Sound Track Album』は発売初週に約1万4000枚を売り上げ、オリコンチャートで初登場5位を記録した。

オープニングテーマ（OP）のアーティストは一貫してA応Pが担当。

エンディングテーマ（ED）では松野家6兄弟が合いの手で参加している。第1期および第3期EDの作詞・作曲・編曲はTECHNOBOYS PULCRAFT GREEN-FUNDが担当。アニメーションは「イヤミ音頭」を除き一貫してアニメスタジオ「dwarf」が担当。

スタッフロールに表記された楽曲のみ記載。一貫して作曲・編曲は橋本由香利。

公式サイトの「ストーリー」で紹介されているエピソードは太字で表記。第3話・第11話・第13話・第14話・第16話・第17話・第19話・第20話は公式サイトの「ストーリー」で画像が掲載されたものを太字で表記。

放送日はテレビ東京のものを基準とする。

第2期以降は全てのエピソードの脚本を松原秀が担当。エピソードの内容も公式サイトの「ストーリー」で全て紹介されているため、複数のエピソードがあるものは前話予告で紹介されたエピソードを太字で表記。例外的に、小編が複数ある第5話・第13話・第20話・第3期7話・第15話は公式サイトの「ストーリー」で画像が掲載されたものを太字で表記。

2017年に期間限定で上映された、六つ子それぞれにスポットを当てた傑作選。4月6日に全国6か所の劇場で先行上映。その後、4月7日から4月13日までは「おそ松部屋」「カラ松部屋」「チョロ松部屋」を、4月14日から4月20日までは「一松部屋」「十四松部屋」「トド松部屋」を上映。全部屋共通の新作パートとして、「銭湯クイズ2」と第2期制作の告知アニメが上映された。主題歌は「はなまるぴっぴはよいこだけ」（「おそ松部屋」「カラ松部屋」「チョロ松部屋」）、「全力バタンキュー」（「一松部屋」「十四松部屋」「トド松部屋」）で、オープニング映像もテレビ版のものがそのまま使われている。

『えいがのおそ松さん』のタイトルで2019年3月15日より公開。 本編は、現在の6つ子が高校卒業を間近に控えた時期の「思い出の世界」に来てしまう、「『おそ松くん』と『おそ松さん』をつなぐストーリー」となる。

2021年6月に制作が決定した新作アニメの第1弾として『おそ松さん〜ヒピポ族と輝く果実〜』のタイトルで2022年7月8日より公開。

• 講談のおそ松さん いろはの「い」（上映時間 45分）
• 講談のおそ松さん いろはの「ろ」（上映時間 48分）
• 講談のおそ松さん いろはの「は」（上映時間 46分）

2023年6月23日公開。詳細は後述。

2023年7月21日公開。6周年記念映画第2弾。劇場公開と同日2023年7月21日より上映劇場にて「劇場限定版Blu-ray」および「劇場限定版DVD」が販売されている。

DVD&Blu-ray収録映像特典短編エピソード。アニメーション制作は10GAUGE。

第2期DVD&Blu-ray収録映像特典短編エピソード。

『オールフリーと楽しむ、この夏イチオシ物語』は2016年6月28日より配信のサントリーオールフリーとのコラボ動画。また『6つ子流 オールフリーの楽しみ方』キャンペーン告知動画も配信された。

第1期&第2期でマツモトキヨシとのコラボCMを放送。また公式サイトでも2018年1月4日まで会員限定動画を配信、マツキヨのコラボアプリ『おそ松さん 6つ子大レース』の関連動画となっている。

2017年12月7日から2018年1月8日まで、アドアーズのサンシャイン店とアニメプラザ町田店で稼働の視聴・体験型VRコンテンツ。PlayStation VRを使い、銭湯をテーマにした完全オリジナルストーリー。

2018年7月2日には新宿バルト9で『映画館でVR!』の1作として『evangelion:Another Impact (VR)』『夏をやりなおす』と共に劇場公開された。

2018年1月9日より映像配信サービスdTVで、コラボレーション短編アニメ『dTVオリジナルショートアニメ d松さん』を配信。全12話。6つ子とトト子、イヤミとの日常会話劇。

『CRおそ松さん〜はじまりはじまり〜』特設サイトで配信の短編アニメ。

映画公開記念として2019年3月1日よりdTVで配信の短編アニメ。

YouTubeおそ松さん公式、AT-X公式および第3期内CMで放送のAT-X15秒CM。

dTVで第3期コラボレーション短編アニメを配信。2021年2月に『dTVオリジナルショートアニメ チョコ松さん〜バレンタインデー編〜』、2021年3月に『dTVオリジナルショートアニメ チョコ松さん〜ホワイトデー編〜』を配信。全6話。

2022年10月6日から29日までHall Mixaで公演の特殊なスクリーンを使用した体験型アトラクション。6つ子（声はアニメ同様）が舞台に登壇し、18種類の演目からお客が観たい演目6本をスマートフォンで投票し多数決で決定した講談を披露する（東京公演千秋楽、仙台公演、劇場版は演目固定）。講談監修は神田春陽。2023年5月3日から28日までCROSS B PLUSで仙台公演を開催。2023年6月23日にはイオンシネマ27館で劇場公開。同日より劇場内でblu-rayも発売。

2023年7月2日から9月24日にかけてBS日テレのアニメにむちゅ〜枠（毎週日曜 23:00 - 23:30）にて放送された、テレビシリーズ第1〜3期のセレクト再放送（第3期の一部は無料BS局初放送）。

テレビ東京（関東ローカル）『イニミニマニモ』内で2023年10月7日、AT-Xで10月12日より放送されたテレビアニメ。全12話。六つ子をモチーフに2018年3月にプライズゲーム商品として誕生した犬のようなキャラクターがアニメ化。

公式X（旧twitter）及びYouTube『TVアニメ「おそ松さん」公式』チャンネルでは振り返り動画『きょうのまついぬ』を配信。振り返りでは遠藤綾によるナレーションがつけられる。

「第○松」という名称で呼ばれている。

上記以外に、以下のBD・DVDも発売されている。

2016年にシリーズ第1弾『おそ松さん 6つ子のお仕事体験 ドラ松CDシリーズ DORAMATSU（どらまつ）』のタイトルで全7巻が発売された。また、2017年にシリーズ第2弾『かくれエピソードドラマCD「松野家のなんでもない感じ」』全3巻、2019年にシリーズ第3弾『かくれエピソードドラマCD「松野家のわちゃっとした感じ」』全3巻がそれぞれ発売された。

ドラ松CDシリーズでは、6巻までは2人1組、7巻は6人全員となってそれぞれが職業体験をする内容となっている。脚本は柿村イサナ（1・2・6・7巻）、ふでやすかずゆき（3・4・5巻）が担当。かくれエピソードでは六つ子の日常を描く内容となっており、こちらは6巻とも全て構成・脚本を松原秀が担当。

オリコンランキングではドラ松CDシリーズ全巻が週間アルバムチャートで5位以内にランクイン。また、7巻以外を除き6作が週間アニメアルバムチャートで1位を獲得。最初に発売された1巻の売り上げは5万枚を突破し、ドラマCDとしては歴代1位の売り上げを記録した。かくれエピソードも全巻が週間アルバムチャートで10位以内にランクインしている。

2020年10月6日よりドラマCDシリーズ全話の単品配信・販売が開始され、全話試聴可能な特設サイト「ドラマCDコレクション」も公開された。

いずれも原作：赤塚不二夫、監修：おそ松さん製作委員会。

この他に『こちら葛飾区亀有公園前派出所』とのコラボレーション小説がある。詳しくは#タイアップ・コラボレーションなどを参照。

上記以外に、複数のスマートフォンアプリとの期間限定コラボを行っている。

• 原作 - 赤塚不二夫「おそ松くん」
• 演出 - 小野真一
• 脚本 - 伊勢直弘、鹿目由紀、小峯裕之、高崎翔太（2nd）
• 音楽 - 橋本由香利
• 劇中歌プロデュース - TECHNOBOYS PULCRAFT GREEN-FUND
• 美術 - 石原敬
• 技術監督 - 寅川英司
• 舞台監督 - 弘光哲也（第1弾・第3弾）、山下翼（第2弾）
• 照明 - 橋本剛（第1弾）、斎藤喜和（第2弾・第3弾）
• 音響 - ヨシモトシンヤ
• 映像 - noadd
• 衣裳 - 八重樫伸登
• ヘアメイク - 車谷結
• 小道具 - 羽鳥健一
• 振付 - FunX、井澤勇貴（2nd）
• 歌唱指導 - 設樂咲枝
• 宣伝美術 - 五島英一
• 制作プロデューサー - 杉田智彦
• 主催 - 「おそ松さん」on STAGE製作委員会2016、「おそ松さん」on STAGE製作委員会2018、「おそ松さん」on STAGE製作委員会2019、喜劇「おそ松さん」製作委員会2018

現在、CD単体での発売なし。

• 松野おそ松：向井康二（Snow Man）
• 松野カラ松：岩本照（Snow Man）
• 松野チョロ松：目黒蓮（Snow Man）
• 松野一松：深澤辰哉（Snow Man）
• 松野十四松：佐久間大介（Snow Man）
• 松野トド松：ラウール（Snow Man）
• トト子：髙橋ひかる
• イヤミ：前川泰之
• チビ太：桜田ひより
• エンド：渡辺翔太（Snow Man）
• クローズ：阿部亮平（Snow Man）
• ピリオド：宮舘涼太（Snow Man）
• 松野松代：濱田マリ
• 松野松造：光石研
• ハタ坊：加藤諒
• 松田善松：栗原類
• ハル：八木莉可子
• オータム：厚切りジェイソン
• レイジ：忍成修吾
• 橋本にゃー：髙石あかり
• 村長：城後光義
• 老婦人：南果歩
• 老紳士：榎木孝明

• 原作：赤塚不二夫『おそ松くん』
• 監督：英勉
• 脚本：土屋亮一
• 音楽：橋本由香利
• 主題歌：Snow Man「ブラザービート」（MENT RECORDING）
• 製作：勝股英夫、川崎由紀夫、藤島ジュリーK.、市原高明、本間道幸、松岡宏泰、藤田浩幸、赤塚りえ子
• 企画・プロデュース：菅原大樹
• エグゼクティブプロデューサー：西山剛史、和田佳恵
• プロデューサー：柳原雅美、宇田充、甘木モリオ
• 撮影：小松高志
• 美術：金勝浩一、乙竹恭慶
• 照明：蒔苗友一郎
• 整音：加来昭彦
• 録音：照井康政
• 編集：相良直一郎
• 装飾：山田好男
• 衣装：白石敦子
• ヘアメイク：内城千栄子、杉山裕美子
• アクションコーディネーター：諸鍛冶裕太
• VFXスーパーバイザー：村上優悦
• カラーグレーダー：齋藤精二
• 選曲：武田拓也
• 音響効果：柴崎憲治
• 宣伝プロデューサー：小山田晶
• 助監督：原田健太郎、高杉考宏
• 制作担当：前芝啓介
• 配給：東宝
• 制作プロダクション：シネバザール、はちのじ
• 製作幹事：エイベックス・ピクチャーズ、テレビ東京
• 製作：映画「おそ松さん」製作委員会（エイベックス・ピクチャーズ、テレビ東京、ジェイ・ストーム、D-techno、ぴえろ、東宝、電通、フジオプロ）

• 2015年10月1日、厚生労働省の最低賃金周知のキャラクターに決定したことが発表された。啓発ポスターでは「シェー」のポーズのイヤミと様々な職業に扮した六つ子（おそ松がサラリーマン、カラ松が鳶職、チョロ松が美容師、一松が建築作業員、十四松が調理師、トド松が保育士）が描かれている。
• 2017年3月2日、テレビ東京系ドラマ『バイプレイヤーズ 〜もしも6人の名脇役がシェアハウスで暮らしたら〜』とのコラボポスターを発表。ポスターは3月7日から12日までの期間限定で、JR各駅などで掲出された。また、同年4月1日のエイプリールフールには、おそ松さん公式サイトに六つ子のパーカーを着用しているドラマの主要キャストが登場、“「おそ松さん」の30年後をまさかの実写化!?”のキャプションをつけて驚かせた。同年6月21日に発売される『バイプレイヤーズ』DVD&Blue-rayBOXの先着購入者スペシャルノベルティに「バイプレイヤーズ×おそ松さん」のコラボステッカーが進呈されることになった。
• 2019年3月21日、映画『PRINCE OF LEGEND』とのコラボポスターを発表。『PRINCE OF LEGEND』のイケメン王子たちになりきって壁ドンを決める6つ子たち（学生時代／大人ver）の「壁ドンポスター えいがのおそ松さんバージョン」となっている。

• 2016年1月1日頃より代々木アニメーション学院が、タイアップとして『おそ松さん』を教材にした声優やアニメーター体験の実施する体験入学の募集を開始し、その後も幾度か2016年6月まで行った。
• 2016年2月17日、「Yahoo!検索きせかえテーマ」に『おそ松さん』が追加された。スマートフォンのYahoo!から「おそ松さん」と検索することで、Yahoo!検索のページデザインを『おそ松さん』仕様に変更することが出来る。
• 2016年2月25日から4月30日までハートアップの店舗で29歳以下の男女とその家族がコンタクトレンズとメガネフレーム購入の際に割引になる「U（アンダー）29割」のキャンペーンキャラになっている。購入者には限定のクリアファイルが、公式アプリにあるニュースへのリツイートにはスマホ壁紙がプレゼントされた。
• 2016年3月18日、『おそ松さん』とNTTドコモのコラボレーション企画「ドコ松さんキャンペーン」の開催が発表された。キャンペーンの第一弾として同日よりTwitterの連動企画が行われ、3月22日から3月25日の期間限定で一松の「しゃべってキャラ」が無料配信された。
• 2016年5月26日、東京・池袋のサンシャインシティプリンスホテルにてコラボレーションイベント『おそ松さん in サンシャインシティプリンスホテル』を開催、6月6日から9月3日までコンセプトルームとオリジナルグッズ付き宿泊プランが設定される。コンセプトルームは5月31日の予約開始日時点で完売した。

• 2016年1月19日、「野球日本代表 侍ジャパンオフィシャルサイト」にて、『おそ松さん』とのタイアップが決定したことが発表され、同年3月5日（ナゴヤドーム）と3月6日（京セラドーム大阪）に行われる台湾戦2試合のS指定席を「おそ松さんシート」と称し、限定コラボグッズ付のチケットを販売することが合わせて告知された。当初は各試合限定300席とされたものの好評により増席が行われ、ナゴヤドーム1700席・京セラドーム大阪1615席が全席完売した。タイアップ企画は「おそ松さんシート」のみにとどまらず、『侍ジャパン』と『おそ松さん』のコラボグッズの販売、「イヤミ」が球場に来場する、試合中に「十四松」による応援メッセージが流れるなど多岐に渡った。また、6日の試合では始球式ならぬ「始シェー式」が開催され、『侍ジャパン』のユニフォームを着たイヤミがお馴染みの「シェー」とピッチングを披露した。
• 2016年9月3日の東京ガールズコレクションで、6つ子の着ぐるみがステージに登場したり、さいたまスーパーアリーナ内の併設会場にて「松の市 in TGC」にてオリジナルグッズを販売。翌年の2017年9月2日でもコラボし、SHOPLIST.com by CROOZステージにて「おそ松さん」ファンを公言するモデルたちがランウェイでコラボ衣装を披露したり、物販スペース「松マルシェー in TGC」が設置。

• 2016年1月26日、ブシロードのオンラインキャラクターカードゲーム『GeneX』の公式サイトにて、『おそ松さん』の参戦が発表された。同年2月22日から『GeneX』のTVCM『おそ松さん』verが放映され、2月27日より配信が開始された。
• 2016年5月2日より5月16日まで、RPG『フルボッコヒーローズ X』にて、コラボクエストやコラボガチャが行われた。
• 2016年5月27日より6月17日まで、パズルゲーム『【18】キミト ツナガル パズル』にて、コラボストーリーやコラボクエスト、コラボガチャがあり、本作オリジナルの「主人公松」というキャラクターも貰えた。2017年11月23日より12月7日まで、新要素のある再コラボをした。
• 2016年6月22日より7月6日まで、ミュージカルリズムゲーム『夢色キャスト』にて、それぞれの作品の衣装のキャラクターやおそ松さんの楽曲、コラボシナリオが配信された。また、2017年11月1日より11月15日まで新たな要素を加えて再コラボした。
• 2016年7月22日より8月5日まで、パネルRPG『ディバインゲート』にて6つ子が登場したりボスとしてトト子や神松が登場するなどした。
• 2016年9月13日より9月26日まで、MMORPG『ブレイブオンライン〜残された光〜』にて、6つ子をはじめとするキャラクターが登場、コラボクエストやコラボガチャがあった。
• 2016年11月7日より11月21日まで、RPG『ゆるドラシル』にて、コラボイベントやコラボガチャなどが行われた。
• 2017年12月21日より2018年1月4日まで、乙女ゲーム『イケメン革命◆アリスと恋の魔法』にて、コラボシナリオやコラボ限定彼カードやコラボアバターガチャなどが行われた。
• 2018年1月13日より1月23日まで、パズルRPG『ぷよぷよ!!クエスト』にて、背景やボタン、ホーム画面などがおそ松さんバージョンになり、コラボストーリーやコラボガチャなどが提供された。
• 2018年1月24日より2月18日まで、リズムゲーム『太鼓の達人 イエローVer.』で、バナパスポートカードを使用して「全力バタンキュー」を遊ぶと、6つ子のゲーム画面のきせかえが入手できた。
• 2018年2月9日より2月19日まで、恋愛ファンタジーゲーム『戦刻ナイトブラッド』にてコラボイベントで6つ子が登場、カードが入手できた。
• 2019年3月15日より3月22日まで、農場ゲーム『LINE ブラウンファーム』にて『えいがのおそ松さん』とのコラボガチャなどができた。
• 2019年4月23日より5月7日まで、タクティカルRPG『セブンズストーリー』にて『えいがのおそ松さん』とのコラボイベントでアイテムなどがでてきた。
• 2020年10月15日より11月15日まで、タクティカルRPG『LINE バブル2』にて『えいがのおそ松さん』とのコラボイベントが行われた。

• コミカライズを担当したシタラマサコの別作品や他作者の作品と何度かコラボレーションを行っている。
• 『ギャルジャポン』:「ギャルジャポン おそ松さん コラボSP!!!」として『別冊マーガレット』（集英社）2016年3月号・6月号に掲載。同作品の単行本第3巻（2016年5月25日発売、ISBN 978-4-08-845590-7）に2編とも収録された。
• 『何してんの神様』：「何してんの神様×おそ松さん」として『週刊ヤングジャンプ増刊ミラクルジャンプ』（集英社）2016年6月号に掲載。同作品の単行本2巻（2017年1月19日発売、ISBN 978-4-08-890586-0）に収録された。
• 『左門くんはサモナー』（作：沼駿）:「サモ松さん」として『ジャンプGIGA』（集英社）2016年vol.2に掲載。『左門くんはサモナー』単行本6巻（2016年10月4日発売、ISBN 978-4-08-880810-9）、『おそ松さん』単行本2巻にそれぞれ同内容のものが収録された。
• 2016年9月17日発売の、漫画『こちら葛飾区亀有公園前派出所』のノベライズアンソロジー『VS.こち亀 こちら葛飾区亀有公園前派出所アンソロジー』（JUMP j BOOKS、ISBN 978-4-08-780795-0）内の一編として、『こち亀』との書き下ろしコラボ小説『〜6つ子の童貞VS.こち亀女子 魂の合コン〜』が掲載されている。作家は『小説 おそ松さん』シリーズ（JUMP j BOOKS）を手掛けた石原宙が担当し、イラストをキャラクターデザインの浅野直之とコミックス版作者のシラタマサコが担当している。

• 『ギャルジャポン』:「ギャルジャポン おそ松さん コラボSP!!!」として『別冊マーガレット』（集英社）2016年3月号・6月号に掲載。同作品の単行本第3巻（2016年5月25日発売、ISBN 978-4-08-845590-7）に2編とも収録された。
• 『何してんの神様』：「何してんの神様×おそ松さん」として『週刊ヤングジャンプ増刊ミラクルジャンプ』（集英社）2016年6月号に掲載。同作品の単行本2巻（2017年1月19日発売、ISBN 978-4-08-890586-0）に収録された。
• 『左門くんはサモナー』（作：沼駿）:「サモ松さん」として『ジャンプGIGA』（集英社）2016年vol.2に掲載。『左門くんはサモナー』単行本6巻（2016年10月4日発売、ISBN 978-4-08-880810-9）、『おそ松さん』単行本2巻にそれぞれ同内容のものが収録された。

• 2016年2月23日から3月14日まで、全国のファミリーマートにて「ファミリーマートのホワイトデー　おそ松さんグッズプレゼントキャンペーン」が実施された。対象商品を購入することで『おそ松さん』のオリジナルグッズが手に入るキャンペーンを複数行っており、ファミリーマートのTwitter公式アカウントをフォローおよびリツイートすると「オリジナルバスタオル」が抽選で手に入るキャンペーンも同時開催された。
• 2016年8月16日から8月29日まで、全国のローソンにて「おそ松さんキャンペーン」が実地された。対象商品を購入することで『おそ松さん』のオリジナルグッズが手に入るキャンペーンを複数行い、また限定商品が発売されたり、ファミリーマートのTwitter公式アカウントをフォローおよびリツイートすると「おそ松さん×からあげクンTシャツ」が抽選で手に入るキャンペーンも同時開催された。

• 2016年6月22日からサントリーのノンアルコールビールテイスト飲料サントリーオールフリーが『おそ松さん』とタイアップしたキャンペーンを行い、6つ子が出演する「オールフリーと楽しむ、この夏イチオシ物語」のキャンペーン告知動画全6編が毎日1編ずつYouTubeにて公開されていった。対象商品に付属するシールを2枚集めて応募すると、『おそ松さん』限定ショートアニメや壁紙と、『おそ松さん』以外に羽田圭介の描き下ろし小説のいずれかがプレゼントされる。
• 2016年10月13日から日本中央競馬会（JRA）とコラボレーションした『走れ!おう松さん』の展開を開始、studioぴえろ制作のTVCMの放送、特設Webサイトでのオリジナル動画やWebコンテンツ、東京競馬場・中山競馬場でのオリジナルグッズの販売やイベントの開催などを予定しているほか、このコラボの一環として12月12日に新作テレビアニメも放送された。

• 2016年6月25日からドラッグストアのマツモトキヨシが『おそ松さん』とタイアップした（マツモトキヨシの）公式アプリのミニゲームの配信と、CMが放映が開始された。ミニゲームは勝つと割引クーポンがもらえるというもので、CMの内容はなごみ探偵を扱ったアニメーション。
• 2016年7月21日にHMVとのコラボレーションが決定し、ティザーサイトがオープンした。コラボグッズの発売が決定している。
• 2016年8月26日に参天製薬の点眼薬・サンテPCとのコラボレーションが決定し、キャンペーン企画が9月1日より開始。
• 2018年のNTTドコモ新CM『星プロ』シリーズで、六つ子とイヤミがカメオ出演。

• 2017年初頭から初夏までサンリオキャラクターズとのコラボを実施し各種グッズが発売された。おそ松がハローキティ、カラ松がタキシードサム、チョロ松がけろけろけろっぴ、一松がニャニィニュニェニョン、十四松がポムポムプリン、トド松がマイメロディになりきっている。
• ウルトラマンとのコラボレーション『ウル松さん』がイラストで実現。六つ子がウルトラマン柄のウル松パーカーを着て、おそ松がおそ松ゾフィー、カラ松がカラ松マン、チョロ松がチョロ松セブン、一松が一松ジャック、十四松が十四松エース、トド松がトド松タロウとなる。またトト子はキングジョー、イヤミはバルタン星人、ダヨーンはカネゴン、チビ太はジャミラ、ハタ坊はピグモン、エスパーニャンコはウルトラニャンとなる。2017年12月以降のイベントでグッズ展開。
• 2018年12月22日から『えいがのおそ松さん』の公開に合わせて『仮面ライダー平成ジェネレーションズ FOREVER』のコラボが決定。6つ子が各平成仮面ライダー（おそ松電王、カラ松ビルド、チョロ松W、一松ジオウ、十四松クウガ、トド松ディケイド）と各ライダーの格好をしたイラストが掲載された。その後、2019年2月12日では仮面ライダー側のお礼として『映画のおそ松さん』のポスターにイマジン（電王にてきたキャラクター）達が6つ子の力でM（モモタロス）おそ松、U（ウラタロス）カラ松、K（キンタロス）十四松、R（リュウタロス）一松、と憑依されたという逆コラボバージョンを披露したポスターが掲載されており更におまけ写真としてイマジン4人とイヤミが「シェー」を披露するポスターが掲載された。
• 『えいがのおそ松さん』の公開に併せて本作と同じスタジオぴえろ制作のアニメ『ブラッククローバー』とのコラボレーションが行われ、『ブラッククローバー』の主人公・アスタとおそ松がお互いの衣装を交換するコラボビジュアルが2019年3月18日発売の『週刊少年ジャンプ』16号にて掲載されたほか、2019年3月26日に放送された『ブラッククローバー』ページ76（第76話）本編にて6つ子がモブキャラとして登場した。

• 2020年9月7日、個人が自分の応援している(推している)キャラクターやアーティスト、団体などに対する“オシタイ気持ち”を、応援広告の掲出によって表現できるサービス【Oshitai -オシタイ-】より、全国紙の一面広告を目指すクラウドファンディングがスタート。募集期間は2020年9月7日から27日までの20日間、目標金額は500万円に設定された。出資額に応じて「応援コメントとペンネームを掲載」と「出資のみ」の2つのパッケージから選べる。
• 当初、この『オシタイ』が同年8月から始まった新サービスだったためか、馴染みが薄かった模様。募集開始しばらくは賛同者の応募率が伸び悩んでいた。
• ところが、9月25日(金)の3期決定記念イベント(無観客生配信)の終了後頃から徐々に応募者が増え、出資済のファンのおすすめコメントなど後押しの効果も相まって、最終日の27日(日)の昼12:30頃に目標達成した。
• 掲載日は初回放送の前日にあたる10月11日(日)。毎日新聞(朝刊)の全面広告ページにて実現された。